Réaction en chaîne de la polymérase

La réaction en chaîne de la polymérase est une méthode grâce à laquelle il est possible de copier un bout déterminé d'ADN (p.ex. un gène déterminé) sur un filament génétique composé de centaines de milliers de lettres et d'en produire, en peu de temps, des milliers de copies.

Les généticiens copient des bouts d'ADN afin d'avoir assez de matériel sur lequel travailler. Par exemple, afin d'examiner s'il y a des fautes d'orthographe au niveau d'un gène qui cause une maladie.

Pour cela, le généticien doit savoir avec quelles lettres le gène commence et avec quelles lettres il finit.

• Primers (amorces): courts bouts d'ADN simple brin identiques au début et à la fin du gène qui doit être copié.
• ADN polymérase: enzyme pouvant copier l'ADN.
• Un grand nombre des quatre éléments constitutifs A, C, G et T.
• Un appareil dont la température peut se régler automatiquement.

Le généticien mélange les primers, l'ADN polymérase et les éléments constitutifs A, C, G et T dans un tube et le place dans l'appareil.

• 94°C: Les deux brins de l'ADN double brin se séparent. Cela produit deux bouts d'ADN simple brin (= dénaturation).
• 60°C: Les primers correspondants se fixent au début et à la fin de chaque ADN simple brin (= appariement).
• 72°C: Le duplicateur d'ADN (ADN polymérase) commence son travail. Il commence au niveau des primers et ajoute les éléments constitutifs l'un après l'autre (= élongation).

Il se forme alors deux double brins d'ADN identiques. On peut répéter plusieurs fois ce cycle de réplication en trois étapes. D'un gène, on obtient ainsi  2, 4, 8, etc. copies. Comme un cycle dure moins de trois minutes, on peut produire en une heure plus d'un million de copies d'un gène.